高效薄層層析板是用薄層層析硅膠,用適當?shù)恼澈蟿┏浞只旌暇鶆蚝螅?jīng)脫氣處理使用進口涂布機械均勻地涂布在潔凈的玻璃板上,晾干后,置于恒溫鼓風干燥箱中經(jīng)105攝氏度活化半個小時而成。板面平整光潔,薄層均勻牢固,無龜裂、氣泡、掉粉等現(xiàn)象。
高效薄層層析板的特點以及制備:
高效薄層層析板是用高純度薄層層析硅膠調(diào)入一定量的粘結(jié)劑噴制成,板面純白、平整均勻、細密。
高效薄層層析板的特點為靈敏度高,斑點清晰,不擴散,而且分離效果好,時間短。正是由于這些特點,才使它能夠在市場上被廣泛應用。
在制備高效薄層層析板時要關(guān)注液體往下流的速度,在操作時要均勻薄厚一致的鋪在載玻片上,然后舀一勺倒在載玻片中間,使其慢慢布滿整塊板面,后再用手輕輕鎮(zhèn)動幾下,注意一定不要有氣泡。
目前,高效薄層層析板在醫(yī)藥、中草藥、有機化工產(chǎn)品、食品的成分及微量雜質(zhì)的鑒定中已得到普遍應用。
高效薄層層析板制備步驟:
1.樣品的溶解:將薄層層析板樣品溶于展開劑極性相近、揮發(fā)性高的有機溶劑。
2.點樣:控制上樣量,點樣基線距底邊2.0 cm,控制樣點直徑(5 mm)及點間距離(1-1.5 cm),避免因擴散而影響檢測(下圖),點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
3. 展層:展層容器必須密封,提前加入展開溶劑,使溶劑蒸氣達到平衡。展開劑不能高于上樣點,否則,無法求得Rf值和準確判斷粗產(chǎn)物中各組分在薄層板上的相對位置。
4. 薄層層析板展開劑的選擇條件:有良好的溶解性、使待分離組分間分開、待測組分的Rf值在0.2~0.8之間、不與待測組分或吸附劑發(fā)生化學反應、沸點適中,黏度較小、展開后組分斑點圓且集中、混合溶劑用新鮮配制。
5. 邊緣效應:邊緣效應是樣品在層析時,薄層板兩邊的斑點比中間斑點移動快,并向兩邊偏斜。其原因是用混合溶劑展開時,極性較弱和沸點較低的溶劑在薄層板兩邊沿處較易揮發(fā),使薄層板上的展開劑比例不一,而出現(xiàn)邊緣效應,解決邊緣效應zui有效的方法是剪去薄層板浸入展開劑一端的兩角。
高效薄層層析板的用途:在醫(yī)藥、農(nóng)藥、中草藥、有機化工產(chǎn)品及糧食、食品的微量雜質(zhì)及主要成份的鑒定中已得到普遍應用。